Occurrence of aflatoxin B1 in natural products

The media claims for the consumption of natural resource-based food have gradually increased in both developing and developed countries. The interest in the safety of these products is partially due to the possible presence of toxigenic fungi acting as mycotoxin producers, such as aflatoxins produced during the secondary metabolism of Aspergillus flavus, A. parasiticus and A. nomius. Aflatoxins, mainly aflatoxin B1, are directly associated with liver cancer in human beings. This paper is aimed at evaluating the presence of aflatoxin B1 in a few vegetable drugs, dried plant extracts and industrialized products traded in 2010 in the city of Belo Horizonte, State of Minas Gerais, Brazil. The method used for the quantification of aflatoxin B1 was based on extraction through acetone:water (85:15), immunoaffinity column purification followed by separation and detection in high efficiency liquid chromatography. Under the conditions of analysis, the Limits of Detection and Quantification were 0.6 µg kg-1 and 1.0 µg kg-1respectively. The complete sets of analyses were carried out in duplicate. Aflatoxin B1 was noticed in a single sample (< 1.0 µg kg-1). The results revealed low aflatoxin B1contamination in the products under analysis. However, it is required to establish a broad monitoring program in order to obtain additional data and check up on the actual extension of contamination.

Influência da irradiação gama na destruição de fumonisina B1 em farinha de milho e de aflatoxina M1 em leite fluido e em pó / Gamma-irradiation effect on fumonisin B1 inactivation in corn flour and on aflatoxin M1 in powdered milk

Fumonisina B1 é a micotoxina produzida por Fusarium verticillioides e Fusarium proliferatum e é encontrada principalmente em milho e produtos a base de milho. Desde sua descoberta a fumonisina B1 tem sido associada a doenças em animais, como leucoencefalomalácia em cavalos e edema pulmonar em suínos. Em humanos, o consumo de alimentos com fumonisina B1 tem sido associado com câncer esofágico. A aflatoxina M1 é o principal metabólito hidroxilado encontrado no leite de animais que consumiram rações contaminadas com aflatoxina B1, bem como no leite de lactantes que consumiram alimentos com esta substância. Neste estudo foi verificado o efeito da irradiação gama (60Co), em doses que variaram de 0 a 20 kGy, quanto à capacidade de inativar fumonisina B1 em farinha de milho e aflatoxina M1 em leite fluido e em pó. A fumonisina B1 foi extraída das amostras com metanol: água(8:2). O extrato foi purificado em coluna de imunoafinidade, seguido de separação e quantificação por meio de cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) com detector de fluorescência, após derivatização com ortoftaldialdeído. Para efetuar a determinação da aflatoxina M1, a amostra foi purificada em coluna de imunoafinidade e a separação e a quantificação por meio de CLAE com detector de fluorescência. Foi observada uma redução da concentração da fumonisina B1 na faixa de 11,2 % a 55,5% em doses de 3 a 20 kGy de irradiação gama (60Co). A concentração de aflatoxina M1 foi reduzida em 86,8 % e 37,9%, respectivamente no leite fluido e em pó, em dose de 20 kGy de radiação.

Influência da irradiação gama (60Co) na destruição da aflatoxina B1 em amendoim (Arachis hypogaea L. ) / Effect of gamma-irradiation (60Co) on aflatoxin B1 inactivation in peanut (Arachis hypogaea L. )

Foi verificado o efeito da irradiação gama (60Co) em doses que variaram de 0 a 30 kGy, na destruição de diferentes níveis aflatoxina B1 em amostras de amendoim, cultivar Tatu Vermelho, artificialmente e naturalmente contaminadas, procedentes de São Paulo, safras 2001/2002 e 2002/2003. A aflatoxina B1 foi extraída em mistura de metanol e KCl 4% (270 + 30, v/v), seguido de clarificação com CuSO4 10% e partição com clorofórmio. A quantificação foi feita por cromatografia em camada delgada, medindo-se a área das fluorescências de amostras e padrões em densitômetro a 366 nm. Doses de irradiação gama (60Co) de 1, 5 e 10 kGy reduziram em cerca de 20% os níveis de aflatoxina B1 em amostras artificialmente contaminadas com 55,3, 105,8 e 159,3 µg.kg-1. As amostras naturalmente contaminadas com aflatoxina B1 (84,0 e 258,3 µg. kg-1) e tratadas com irradiação gama (60Co) em doses de 5 e 10 kGy, não apresentaram redução do teor de aflatoxina B1. Entretanto, as amostras naturalmente contaminadas com aflatoxina B1 (86,0 e 248,0 µg.kg-1) e irradiadas nas doses de 15, 20, 25 e 30 kGy apresentaram valores menores de aflatoxina B1, com faixa de redução que variou de 49 a 72%. Desta forma, pode-se concluir que a irradiação gama (60Co) não é capaz de destruir totalmente a aflatoxina B1 em condições naturais, mesmo em doses de até 30 kGy.

Influência da irradiação gama na produção de aflatoxina B1 e no crescimento de cepa toxigênica de Aspergillus flavus em amendoim (Arachis hypogaea L) / Gamma-irradiation effect on aflatoxin B1 production and growth toxigenic strain of Aspergillus flavus in peanut (Arachis hypogaea L. )

Foi verificado o efeito da irradiação gama (60Co), em diferentes doses, na destruição de cepa aflatoxigênicae na produção de aflatoxina B1 por Aspergillus flavus IMI 190443, em amendoim, cultivar Tatu Vermelho, safras 2001/2002 e 2002/2003. Foram feitos dois testes nas amostras, um deles envolvendo irradiação e posterior inoculação e outro, com inoculação antes da irradiação. A destruição do Aspergillus flavus IMI 190443, após irradiação, foi medida pela porcentagem de infecção fúngica, por meio da técnica do plaqueamento direto. A aflatoxina B1 foi extraída em mistura de metanol e KCl 4% (270 + 30, v/v), seguido de clarificação com CuSO4 10% e partição em clorofórmio. A quantificação foi executada por cromatografia em camada delgada, medindo-se a área das fluorescências de amostras e padrões em densitômetro a 366 nm. A inoculação de amendoim previamente irradiado, com cepa aflatoxigênica, provocou a formação deteores elevados de aflatoxina B1. Doses de irradiação gama de 25 e 30 kGy foram necessárias para a completa inativação de esporos

Afloxina M1 em queijo prato e parmesäo determinada por coluna de imunoafinidade e cromatografia líquida / Aflatoxin M1 in soft and parmesan chesse by immunoaffinity column and liquid chromatography

Produtos derivados de leite, como o queijo, podem estar com aflatoxina M1 (AFM1) quando o gado leiteiro consome raçäo contendo aflatoxina B1 (AFB1). Amostras de queijo tipo prato e tipo parmesäo ralado foram coletadas na cidade de Belo Horizonte pela Vigilância Sanitária de Minas Gerais - Brasil. Foi obtido um extrato purificado através de extraçäo com diclorometano, seguido de lavagem com n-hexano e purificaçäo em coluna de imunoafinidade. A quantificaçäo da AFM1 foi feita por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) usando detetor de fluorescência. AFM1 foi detectada em todas as marcas de queijo tipo prato analisadas, em uma faixa de concentraçäo de 0,02 a 0,54 ng/g e média de 0,15 ng/g. Em queijo ralado, tipo parmesäo, AFM1 foi detectada em 13 das 14 marcas de amostras analisadas (93 por cento), em faixa de concentraçäo de 0,04 a 0,30 ng/g e média de 0,14 ng/g. (AU)

Aflatoxin M1 was determined in Soft and Parmesan cheese by immunoaffinity columnand liquid chromatography. Milk products such as cheese may be contaminated by aflatoxin M1 (AFM1)when dairy cattle have consumed feeds contaminated with aflatoxin B1 (AFB1). Samples of Soft andParmesan cheese were collected in Belo Horizonte city, by the Inspection Service of Minas Gerais ­Brazil. A purified extract was obtained by extraction with dichloromethane followed by a washing withn-hexane and immunoaffinity column clean-up. The quantification of AFM1 was done by highperformance liquid chromatography (HPLC) using a fluorescence detector. AFM1 was detected in allsoft cheese brands analysed, in concentrations ranging between 0.02 and 0.54 ng/g and mean level of0.15 ng/g. In grated cheese, Parmesan variety, AFM1 was detected in 13 of 14 brands analysed (93%),in the range 0.04-0.30 ng/g with mean level of 0.14 ng/g. (AU)

Ocorrência de patulina em suco de maçä por cromatografia líquida de alta eficiência / Ocurrence of patulin in apple juice by high-performance liquid chromatography

Patulina é uma micotoxina produzida por várias espécies de fungos (Penicillium, Aspergillus e Biossochlamys), principalmente pelo Peniccillium expansum, fungo presente nas maçäs podres. É um composto tóxico, que em experimentos com animais tem demonstrado ter atividade mutagênica, carcinogênica. O conteúdo de patulina em suco de maçä é um bom indicador da qualidade das maçäs utlizadas no processamento. Treze marcas comercializadas em Belo Horizonte/Minas Gerais foram coletadas entre março e setembro de 1999. A metodologia utilizada foi a cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) em fase reversa. Patulina foi extraída com acetato de etila e o extrato foi purificado por participaçäo com soluçäo de carbonato de sódio. A separaçäo e quantificaçäo foi realizada em um cromatógrafo líquido por meio de uma coluna de fase reversa C18(3um) e detetor de ultravioleta a 278nm. Patulina e 5-hidroximetilfurfural (5-HMF) foram completamente separados utilizando como fase móvel 0,8(por cento) tetrahidrofurano em água contendo 0,02(por cento) de azida de sódio em uma vazäo de 0,5mL/minuto. O limite de detecçäo foi <5ug/L. Foram obtidos recuperaçöes média de patulina superiores a 73(por cento) e coeficientes de variaçäo menores que 7(por cento). Patulina foi detectada em apenas uma amostra (10ug/L). Apesar da baixa incidência de patulina em suco de maçä neste estudo, autoridades brasileiras de saúde devem continuar a monitorar estes produtos. (AU)

Patulin is a mycotoxin produced by several species of moulds (Penicillium, Aspergillus andBissochlamys), but mainly by the apple-rotting fungus Penicillium expansum. Patulin is a highly toxiccompound that has been shown to be mutagenic, carcinogenic and teratogenic in experiments with animals.The patulin content of apple juice is a good indicator of the quality of the apples used in the process.Thirteen brands were collected from retail markets in the city of Belo Horizonte, state of Minas Gerais,Brazil, between March and September 1999. A rapid reversed-phase liquid chromatographic determinationof patulin was used. Patulin was extracted with ethyl acetate and the extract was cleaned up by partitionwith sodium carbonate solution. The identification and quantification of patulin was determined by C18reversed phase column (3 µm) and a variable-wavelength UV-VIS detector set at 278 nm. Patulin and 5-hydroxymethylfurfural were completely resolved by using 0,8% tetrahydrofuran in water containing 0,02%sodium azide as the mobile phase at a flow rate of 0,5 mL/min. The detection limit was < 5 µg/L. Averagerecoveries greater than 73% of patulin and coefficients of variation of less than 7% were obtained. Patulinwas detected in only one sample (10 µg/L). Although the incidence of patulin in apple juice in the presentstudy was low, Brazilian health authorities should continue monitoring these products. (AU)